分子克隆及蛋白表达常见问题和对策一、重要意义与应用(一)重要意义分子克隆技术起步于上世纪70年代1、开辟了分子生物学研究的新领域;2、打开了人类了解、识别、分离和改造基因,创造新物种的大门;3、对工业、农牧和医药业产生深远影响;4、将为解决世界面临的能源、食品和环保三大危机开拓新的出路。一、重要意义与应用分子克隆技术基因工程细胞工程酶工程发酵工程紧密联系、综合利用(二)在工业生产中的应用一、重要意义...
可编辑ppt1第二章基因工程的工具酶与载体第三节表达载体二、融合蛋白表达系统可编辑ppt2表达载体的基本结构表达蛋白的识别?表达蛋白的分离?表达蛋白的活性?蛋白表达的高效性?蛋白表达的可控性?可编辑ppt31、融合蛋白表达系统的概念蛋白质融合表达是指外源基因与载体已有的担体蛋白的编码基因拼接在一起,并作为一个新的开放阅读框进行表达。目的基因目的基因启动子启动子担体基因担体基因接头接头MetMetStopStop载体可编...
蛋白表达及纯化Part1:蛋白表达、纯化蛋白表达流程1.目的基因cDNA2.表达宿主3.载体4.设计引物5.连接转化6.诱导表达7.蛋白纯化8.鉴定保存gene0.000.100.200.300.400.500.60正常对照NS1免疫病毒感染疫苗免疫OD450值Cell-freeBacterialYeastInsectMammalianHostExpressionSystemCharacteristicsCharacteristicsE.coliYeastInsectMammaliandoublingtimerapid(30min)rapid(90min)slow(18-24hrs)slow(24hrs)costofgrowthmediumlowlowhi...
RUNX3RUNX3蛋白表达、基因甲基化及多态与蛋白表达、基因甲基化及多态与胃黏膜病变的关系胃黏膜病变的关系研究背景研究背景——RUNX3RUNX3与胃癌与胃癌•基础研究证据:胃癌的候选抑制基因。基础研究证据:胃癌的候选抑制基因。•基础研究证据:与正常胃黏膜生理功能有关。基础研究证据:与正常胃黏膜生理功能有关。1.TGF-β1.TGF-β通路的下游靶分子通路的...
Cripto-1和p-STAT3蛋白表胃癌达与生和移的系及意发转关义Cripto-1(CR-1)为表皮生长因子-CFC(EpidermalGrowthFactor-Cripto-1/FRL-1/Cryptic)家族成员,具有调节细胞分化和早期胚胎发育的功能。CR-1也是一个重要的癌基因生长因子,与人类多种恶性肿瘤的发生和转移密切相关。目前研究表明CR-1主要通过激活丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)与PI3K/AKT信号通路...